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一個使用了120年的依舊年輕的技術-凱氏定氮

更新時間:2024-02-22   點擊次數:158次

凱氏定氮法是由丹麥化學家凱道爾于1883年建立的。

凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此法是經典的蛋白質定量方法。

凱氏定氮儀 產品應用及優點:

DRK-K616全自動凱氏定氮儀是根據凱氏定氮法進行氮含量測定的自動智能化分析儀。它可廣泛應用于食品加工、飼料生產、煙草、畜牧、土肥、環境監測、醫藥、農業、科研、教學、質量監督等領域做常量、半微量樣品氮與蛋白質的分析,還可用于銨鹽、揮發性脂肪酸/堿等的檢測。用凱氏定氮法測定試樣時,需經過 消化、蒸餾、滴定 三個過程。蒸餾和滴定是DRK-K616型凱氏定氮儀的主要測定過程。

DRK-K616型凱氏定氮儀是根據經典凱氏定氮法設計的全自動蒸餾,滴定測氮系統;該儀器給實驗室測定人員在進行測定氮—蛋白質過程中,提供了極大的方便,且具有使用安全,可靠;操作簡單,省時等特點。中文對話界面使用戶操作方便,界面友好,顯示的信息豐富,使用戶能夠快速掌握儀器的使用。

根據凱氏定氮原理測定,需要三個步驟,即消化、蒸餾、滴定。

凱氏定氮 工作原理——消化

將含氮的有機化合物(蛋白質)與濃硫酸和催化劑(硫酸銅或凱氏消化片)一同加熱,使蛋白質分解,其中碳和氫被氧化成二氧化碳和水逸出,而樣品中的有機氮轉化為氨(NH3)并與硫酸結合形成硫酸銨。(銨 NH4+)

消化過程:

微火加熱煮沸,燒瓶內物質炭化變黑,產生大量泡沫,泡沫消失后加大火力保持微沸狀態,至液體成藍綠色澄清狀態后繼續加熱 05-1h,結束后冷卻。

(可使用自動消解儀完成前處理工作)

凱氏定氮 工作原理——蒸餾

得到的溶液經稀釋定容后加入NaOH,蒸餾釋放出NH3,冷凝之后收集于硼酸溶液中。

蒸餾過程:

先將消化好的樣品進行稀釋,加入NaOH,經過加熱后產生的氨氣進入冷凝管,經過冷凝之后流入裝有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸銨。

(硼酸溶液中加有混合指示劑,形成硼酸銨之后吸收液由酸性變為堿性,顏色由紫紅轉變為藍綠色。)

凱氏定氮 工作原理——滴定

用已知濃度的鹽酸標準溶液進行滴定,根據鹽酸消耗的量來計算出氮的含量,然后乘以相應的換算因子,即得到蛋白質的含量。

(滴定是指一種定量分析的手段,也是一種化學實驗操作。它通過兩種溶液的定量反應來確定某種溶質的含量,是根據指示劑的顏色變化指示滴定終點,然后目測標準溶液消耗體積,計算分析結果)

滴定過程:

用鹽酸標準溶液滴入硼酸銨溶液中,使溶液的顏色由藍綠色變為淺紅色。


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